Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale

Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale

Folosind culturi primare de la șoareci de tip sălbatic și HtrA2-knockout, constatăm că deficiența HtrA2 reduce semnificativ potențialul membranei mitocondriale într-o gamă de tipuri de celule. Această depolarizare s-a constatat că rezultă din decuplarea mitocondrială, deoarece respirația mitocondrială a fost crescută în celulele cu deficit de HtrA2 și raportul de control respirator a fost redus dramatic.

Celulele HtrA2-knockout prezintă o translocare crescută a protonilor prin sintaza ATP, în combinație cu scăderea producției de ATP și trunchierea subunității a F, sugerând sintaza ATP ca sursă de scurgere a protonului.

Pierderea în greutate și dieta

Decuplarea la șoarecii cu deficit de HtrA2 este însoțită de un model de respirație modificat și, la nivel celular, epuizarea ATP și vulnerabilitatea la ischemia chimică. Propunem ca această vulnerabilitate să determine, în cele din urmă, neurodegenerarea observată la acești șoareci. Principal Serina protează HtrA2 a fost identificată mai întâi ca o proteină pro-apoptotică care este eliberată în citozol după deschiderea porului tranzitoriu al permeabilității mitocondriale revizuit în Vande Walle et al.

Cu toate acestea, șoarecii HtrA2-knockout KO demonstrează neurodegenerarea striatală 2 și moartea prematură, iar mutațiile genei HtrA2 au fost de asemenea identificate la pacienții cu boală Parkinson și germană, 3, 4 sugerând rolul proteinei în neuroprotecție. Șoarecii care nu au HtrA2 funcțional și celulele derivate din ele prezintă o funcție mitocondrială insuficientă, 2, 5 și Drosophila lipsită de HtrA2 au prezentat un număr crescut de mitocondriile defecte, toate sugerând un rol crucial pentru HtrA2 în menținerea fiziologiei mitocondriale.

Prin urmare, am investigat efectul deficienței HtrA2 asupra funcției mitocondriale folosind o combinație de microscopie viu și tehnici biochimice. Aici, vom arăta că celulele derivate de la șoareci HtrA2-KO prezintă scăderea potențialului membranei mitocondriale ΔΨ mdar creșterea respirației mitocondriale, sugerând o decuplare severă a fosforilării oxidative.

Magazin Salajean Asa cum probabil va imaginati, exista o sumedenie de pastile de slabit pe care le puteti regasi pe piata de profil. Este usor sa fii atras in mrejele acestei oportunitati, insa trebuie sa constientizezi faptul ca unele dintre acestea sunt doar promisiuni in van cu rezultate de scurta durata. Pornind de la acest adevar al industriei, ne-am gandit impreuna cu specialistii din spatele portalului pastileslabit. Pentru a naviga mai usor prin labirintul de optiuni, pentru a-ti spori sansele de succes dar si pentru a ramane in conditii de siguranta te rugam sa urmezi aceste sfaturi de specialitate: Urmeaza regula de pierdere a grasimilor : Corpul tau nu vrea sa piarda in greutate.

Acestea arată o hiperpolarizare crescută ca răspuns la oligomicină, dar producția de ATP scăzută de către sintaza ATP, sugerând că scurgerea de protoni are loc prin sintaza ATP în sine, indicând un rol nou pentru HtrA2 în menținerea acestui complex de proteine.

Această decuplare conduce, la rândul său, la o modificare a modelului de respirație in vivo, la depleția celulară a ATP și la o vulnerabilitate crescută la ischemia chimică, care poate sta la baza neurodegenerării și a mortalității prematură observate la animalele HtrA2-KO. Folosind tetrametilrodamină metilester TMRM ca indicator fluorescent al ΔΨ m, am constatat că deficiența HtrA2 a indus o scădere semnificativă a ΔΨm bazal în toate tipurile de celule primare studiate Figura 1a.

Interesant, această scădere a fost cea mai semnificativă în neuronii midbrain, chiar și în comparație cu astrocitele învecinate sau cu neuronii corticali de la aceleași animale.

S-a observat scăderea ΔΨm nu numai în culturi primare cerebrale, ci și în miococi primari de la animale cu deficit de HtrA2 Figura 1a și în alte modele, cum ar fi fibroblastele embrionare de șoarece imortalizate MEF datele nu sunt prezentate. Prin urmare, HtrA2 este probabil să fie esențială pentru funcția mitocondrială sănătoasă în țesuturi multiple, în special în neuronii midbrain.

Mitochondria este depolarizată în celule cu deficit de HtrA2. Pentru a investiga mecanismul de menținere a ΔΨ m, am aplicat o serie de toxine mitocondriale și am observat efectele lor asupra ΔΨ m.

fata de scadere in greutate

Aplicarea rotenonei 5 uM pentru a inhiba complexul I a produs apoi o depolarizare profundă, iar depolarizarea completă a fost estimată prin adăugarea FCCP necompletator mitocondrial 1 uM, Figura 1c.

Acest lucru indică faptul că în neuronii WT midbrain majoritatea ΔΨ m este menținută de lanțul respirator.

Ce trebuie sa faci pentru a pierde in greutate intr-o maniera sanatoasa?

În cazul neuronilor mediani de mărime HtrA2-KO, aplicarea de oligomicină a determinat, de asemenea, hiperpolarizarea Figura 1dindicând că ΔΨ m este încă menținut de lanțul respirator mitocondrial și sugerând că, chiar și în condiții de ΔΨ m foarte scăzută, sintaza ATP în HtrA2- deficitul de neuroni și astrocite nu poate trece la modul de hidroliză. Administrarea mitocondrială este crescută în celulele deficiente de HtrA2 Există mai multe explicații posibile pentru o reducere a ΔΨm, incluzând deteriorarea lanțului respirator mitocondrial sau decuplarea fosforilării oxidative.

Pentru a investiga respirația mitocondrială specifică fie în neuroni, fie în astrocite, am măsurat autofluorescența NADH în co-culturile neuronilor primari și astrocitelor și am calculat indicele redox.

În plus, piscina mitocondrială totală de NADH autofluorescență maximă minus minim poate fi luată ca o indicație a disponibilității substratului pentru complexul I. Administrarea mitocondrială este crescută în celulele deficiente de HtrA2.

pierde în greutate bratara

Indicele Redox nivelul inițial de redox exprimat ca procent din interval și nivelul NADH mitocondrial diferența în valorile absolute dintre autofluorescența minimă și maximă NADH sunt descrise grafic.

Datele prezentate sunt urme reprezentative ale neuronilor unici ai miezului mijlociu. Datele sunt reprezentate ca medie ± SEM. Foarte important, cel mai mic indice redox a fost observat din nou la neuronii midbrain Figura 2bcorelând cu ΔΨ m scăzut în aceste celule. Activitatea complexului II poate fi estimată în mod similar prin măsurarea autofluorescenței flavoproteinelor, 10 deoarece FAD H2 este cofactorul redox pentru complexul II. Am observat că consumul de oxigen bazal a fost semnificativ crescut în celulele HtrA2-KO comparativ cu celulele martor.

cel mai bun mod de a arde grăsimea de pe șolduri

Consumul de oxigen este crescut în celule cu deficit de HtrA2. Am constatat că deficiența HtrA2 conduce la un consum semnificativ de oxigen crescut în respirația de stat 3, fie că se utilizează substraturi pentru complexul I 5 mM glutamat și 5 mM malat sau substraturi pentru complexul II 5 mM succinat în prezența rotenonei; Diferența dintre ratele de respirație între mitocondriile HtrA2-WT și KO a fost chiar mai mare la respirația de stat 4 fără stimularea ADP, Figura 3c.

RCR este raportul dintre respirația de stat 3 stimularea ADP și respirația de stat 4 fără ADP și este considerată o indicație a gradului de cuplare a activității lanțului respirator mitocondrial la fosforilarea oxidativă. Aceste date demonstrează decuplarea mitocondrială severă la celulele cu deficiență de HtrA2, explicând scăderea ΔΨ m dar creșterea ratei de respirație mitocondrială. Producția reactivă de specii de oxigen mitocondrial este redusă la celule cu deficit de Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale Rata producției de specii reactive de oxigen mitocondrial ROS depinde de valoarea lui ΔΨ m și sa demonstrat că decuplarea fosforilării oxidative mitocondriale de către FCCP duce la o scădere Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale producției de ROS mitocondrial.

Aplicarea rotenonei 5 μM a inhibat complexul I și a accelerat rata producției ROS mitocondriale atât la neuronii WT cât și la HtrA2-KO la aceeași rată maximă, sugerând că rata redusă a producției de ROS în celule cu deficit de HtrA2 nu este rezultat al respirației mitocondriale reduse.

Neuronii ambelor genotipuri au răspuns în mod egal la stimularea producției de ROS utilizând rotenonă 5 uM. Adăugarea de ATP 1 mM la celule a indus absorbția de calciu în mitocondriile, ceea ce stimulează respirația mitocondrială și în consecință creșterea producției de ATP mitocondrial.

perioadele se opresc din cauza pierderii în greutate

Aceasta indică faptul că, deși translocarea protonului prin sintaza ATP este crescută în celule HtrA2-KO indicată prin hiperpolarizare ca răspuns la oligomicinăproducerea de ATP de către sintază este redusă, în concordanță cu o eventuală scurgere a protonilor prin porul F1F 0 -ATP sintaza. Traseele reprezentative sunt afișate pentru un WT și un coverlip KO. Luminescenta initiala este normalizata la 0 si raspunsul la luciferina este normalizat la 1. Fragmentele identificate sunt evidențiate pe secvența de lungime întreagă a subunității-a în roșu.

dieta ketogenică și sănătatea creierului

În subunitatea trunchiată, acoperirea secvențelor bune a fost obținută pentru capătul C-terminal, dar nu pentru capătul N-terminal al proteinei, sugerând că trunchierea poate elimina MTS cutie gri Imagine de dimensiune completă Pentru a investiga acest lucru, am evaluat dacă HtrA2 ar putea interacționa cu sintaza ATP.

Acest vârf a fost identificat prin spectrometrie de masă ca o formă trunchiată a subunității-a, lipsită de aproximativ 20 kDa la capătul N-terminal al proteinei incluzând secvența de direcționare mitocondrială MTS; Figura 5c. Pentru a exclude posibilitatea ca această trunchiere să se poată produce prin splicare alternativă, ARN a fost extras din țesuturile cerebrale WT și HtrA2-KO și s-a efectuat PCR cantitativă în timp Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale utilizând perechi de primer proiectate peste fiecare limită a exonului genei ATP5A1- subunitate figura suplimentară 2.

scădere în greutate ft myers

Deficitul de HtrA2 reduce nivelul de ATP și crește vulnerabilitatea la ischemia chimică Am investigat în continuare efectul decuplării mitocondriale asupra nivelurilor ATP celulare Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale a viabilității celulare. Mag-Fura este un indicator fluorescent al cationilor bivalenți, cu o afinitate ridicată pentru magneziu și o afinitate mult mai scăzută pentru calciu. Ca atare, ea poate fi utilizată atât pentru a investiga nivelele ATP în celule individuale, deoarece ATP se leagă de magneziu și, prin urmare, nivelurile ATP sunt invers proporționale cu magneziu liber, 14 și de a investiga citotoxicitatea ca răspuns la epuizarea ATP, deoarece în aceste condiții celula nu mai poate să-și mențină homoeostaza ionică și inundațiile cu calciu.

Acest lucru indică faptul că celulele HtrA2-KO sunt mai vulnerabile decât WT la colapsul bioenergetic ca răspuns la ischemia chimică. Inhibarea respirației mitocondriale de NaCN 1 mM determină o creștere lentă a raportului Mag-Fura, deoarece nivelurile ATP sunt epuizate, urmată de o creștere bruscă a raportului Mag-Fura deoarece nivelurile ATP sunt insuficiente pentru a menține homoeostaza ionică, iar inundațiile celulelor cu calciu.

Timpul până la debutul acestui colaps bioenergetic este semnificativ mai scurt în neuronii HtrA2-KO comparativ cu WT cuantificat în cdatele reprezentate ca medie ± SEMindicând o vulnerabilitate crescută la ischemia chimică. Imagine de dimensiune completă Activitatea de respirație este modificată la șoarecii cu deficit de HtrA2 În cele din urmă, am investigat dacă decuplarea mitocondrială observată la șoarecii cu deficit de HtrA2 este asociată cu creșterea efortului respirator in vivo.

Astfel, decuplarea mitocondrială la șoarecii cu deficit de HtrA2 este însoțită de un efort respirator semnificativ redus, care poate contribui la mortalitatea prematură la aceste animale transgenice.

  1. Semne de alarma: pierdere in greutate (scadere in greutate) involuntara | icumparaturi.ro
  2. Rdi să slăbească
  3. Sinteza steroizilor.
  4. Recent, pe fondul entuziasmului mare, câteva astfel de gene au fost clonate de la șoareci și oameni și este foarte probabil ca factori genetici suplimentari să fie identificați în curând.
  5. Pierderea în buncăr
  6. Keto AMPK este activat atunci când energia celulară scade.

Întreaga respirație a animalelor este redusă la șoarecii cu deficit de HtrA2. Pierderea HtrA2 sa dovedit a duce la scăderea ΔΨ m 5 și la morfologia și ultrastructura mitocondrială anormală. În plus față de sistemele de mamifere, au fost găsite de asemenea muște HtrA2-KO care prezintă un defect locomotor progresiv și s-a descoperit, de asemenea, că au crescut numărul de mitocondriile defecte.

Ce trebuie sa faci pentru a pierde in greutate intr-o maniera sanatoasa? – Magazin Sălăjean

În mod evident, ΔΨ m a fost cel mai scăzut în neuronii midbrain, chiar în comparație cu neuronii corticali. Acest fenotip specific regiunii este deosebit de interesant, deoarece este vorba despre neuronii miezului mozar, care sunt afectați în mod special în PD, care leagă fenotipul mitocondrial față de fenotipul comportamental parkinsian observat la acești șoareci. Motivul pentru această specificitate nu este clar, dar este puțin probabil ca acesta să se datoreze naturii dopaminergice a neuronilor midbrain, deoarece doar o mică proporție este TH-pozitivă datele nu sunt prezentate.

O posibilitate este că diferențele în profilurile de expresie ale neuronilor din cele două regiuni ale creierului pot reprezenta o diferență. Aflăm că această decuplare duce la o stimulare semnificativă a respirației celulare și reducerea RCR. Acest lucru sugerează că decuplarea este cea mai severă la acești neuroni. În continuare am încercat să identificăm modul în care pierderea HtrA2 ar putea duce la decuplarea mitocondrială.

HtrA2 este o protează și astfel o posibilitate atractivă ar putea fi faptul că aceasta este responsabilă de fluctuația proteinelor de decuplare mitocondrială UCP. ATP sintaza este capabila sa lucreze in doua directii: in conditii normale, ea foloseste translocatia de protoni in matricea mitocondriala pentru a cataliza sinteza ATP, dar in conditii de ΔΨ m m actioneaza invers, hidroliza ATP pentru a protonii de pompare din mitocondriile și menținând astfel o ΔΨ m suficient de mare pentru a preveni tranziția mitocondrială a permeabilității revizuită în Nicholls și colab.

ΔΨ m în neuronii midbrain HtrA2-KO este extrem de scăzut și deci ar fi de așteptat ca sintaza ATP să acționeze în modul său invers, caz în care adăugarea Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale oligomicină pentru a bloca sintaza ATP ar duce la depolarizare. Sinteza ATP a mamiferelor este un complex de peste 20 de subunități și este cea mai abundentă enzimă exprimată din membrana interioară mitocondrială.

  • Corp subțire png
  • Surse de informatie Semne de alarma: pierdere in greutate scadere in greutate involuntara Scaderea inexplicabila in greutate sau slabirea neintentionata — in special, daca este semnificativa sau persistenta — ar putea fi un semn al unei probleme medicale.
  • Sirop de slăbire
  • Pierderea în greutate și dieta | icumparaturi.ro
  • Acest articol a fost actualizat Abstract Țesutul adipos se adaptează metabolic la stimuli externi.
  • Nivelurile mRNA ale mucoaselor UCP-3 sunt crescute în scăderea în greutate asociată cu adenocarcinomul gastrointestinal la om Noiembrie Abstract Proteinele de decuplare mitocondriale-2 și -3 sunt mediatori presupuși ai termogenezei și a cheltuielilor cu energia.
  • Este carne de vită măcinată sănătoasă pentru pierderea în greutate
  • Cum să slăbești încet și în siguranță

În ciuda acestei complexități, au fost identificate foarte puține autorități de reglementare externe ale sintazei ATP. În acest studiu observăm că HtrA2 interacționează cu sintaza ATP în condiții bazale și că o formă trunchiată a subunității-a a sintazei apare în mitocondriile hepatice izolate HtrA2-KO.

Deși aceasta nu a fost singura proteină identificată ca lipsă sau semnificativ redusă în mitocondriile HtrA2-KO pete corespunzătoare GR78, GR75, CH60 și SCB2 au fost, de asemenea, redusea fost singura proteină pentru care a fost identificat un produs Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale clivare și cel mai probabil candidat pentru a explica fenotipul observat.

Subunitatea a este o subunitate critică a sintazei ATP sub forma a trei subunități-a substituibile cu trei subunități p pentru a forma inelul prin care se rotește tulpina Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale a sintazei ATP. Această rotație determină ca siturile catalitice localizate pe subunitățile β să sufere modificări conformaționale care duc la adăugarea de fosfat anorganic la ADP.

Este tentant să se speculeze, așadar, că modificările din această subunitate ar putea duce la o slăbire a structurii, care ar permite protonilor să treacă prin porii sintazei fără ca rotația ulterioară să fie utilizată pentru a produce ATP.

Unele precedente au fost prezentate în literatura de specialitate: activitatea din Escherichia coli a arătat că un număr de mutații în sintaza ATP conduc la decuplarea intrinsecă mitocondrială prin afectarea interacțiunilor subunităților în domeniul F1, 18, 19, în timp ce în celulele mamifere o mutație în subunitatea 6 a sintazei ATP cunoscută a provoca neuropatia optică hermenetică a lui Leber, a arătat că are ca rezultat o scurgere de protoni prin sintaza ATP. De asemenea, s-a arătat că mutațiile ATP6 au modificat formarea cristae în celulele Drosophila21 furnizând o legătură între modificările în sintaza Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale și modificările în ultrastructura mitocondrială, cum ar fi cele raportate în celule cu deficiență de HtrA2.

arzător de grăsimi acasă

Acest punct de timp reflectă experimentele fiziologice mitocondriale anterioare, toate realizate fie în celule, fie în mitocondriile izolate de șoareci presimptomatici. Mitochondria izolată de la șoarecii mai vechi HtrA2-KO a fost descoperită anterior ca având respirație afectată, 22 care poate apărea mai târziu în viață, explicând discrepanța.

Micșorarea glutationului conduce programul termogen în celulele adipoase

În mod surprinzător, ventilația in vivo a scăzut în ciuda respirației mitocondriale crescute observate în mitocondriile izolate de șoareci KO la aceeași vârstă. Această combinație a unei reduceri a aportului de oxigen cuplată cu o creștere a consumului de oxigen poate contribui la patologia acestor animale în viața ulterioară. O întrebare majoră rămasă este cum pierderea HtrA2 duce la trunchierea subunității α. În sprijinul acestei ipoteze, trunchierea observată a fost găsită în mitocondriile izolate, dar nu are 20 kDa N-terminal al proteinei, care include MTS.

Deoarece MTS este necesar ca o proteină să fie recunoscută de translocaza membranei exterioare, acest lucru sugerează că peptida a fost trunchiată după trecerea membranei exterioare, probabil la punctul de trecere a membranei mitocondriale interne pentru o examinare a importului mitocondrial, Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale Schmidt și colab.

Proteina greșită în mod greșit ar apărea astfel în spațiul inter-membranar, unde HtrA2 ar fi în mod normal plasat perfect pentru ao degrada. Pe de altă parte, descoperim că HtrA2 interacționează cu subunitatea a- subunitate completă a sintazei ATP în condiții bazale și gena ATP5A1 este reglată transcripțional în creierul HtrA2-KO, ceea ce poate indica un mecanism compensator.

Vor fi necesare studii suplimentare pentru a elucida complet acest mecanism.

Genetica consumului de alimente, greutatea corporală și obezitatea

În rezumat, am caracterizat patologia mitocondrială în celule cu deficit de HtrA2 și am identificat un posibil mecanism de neurotoxicitate. Această lipsă de ATP la rândul său face ca celulele deficiente de HtrA2 să fie mult mai vulnerabile la citotoxicitate ca răspuns la orice inhibiție ulterioară a respirației mitocondriale și propunem această vulnerabilitate la condițiile ischemice Pierderea în greutate a decuplării mitocondriale pot determina în cele din urmă moartea neuronală observată în HtrA2- de șoareci deficitari.

Informatie suplimentara.

Asevedeași